3xFlag peptide

貨號(hào)：F1001

存儲(chǔ)條件：-20oC保存，至少一年有效。粉末裝也可以4oC保存，一年有效。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

3X Flag Peptide (3X Flag多肽)是一種常用于通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合Anti-Flag抗體，從而在免疫沉淀時(shí)洗脫與Anti-Flag抗體結(jié)合的Flag融合表達(dá)蛋白的多肽。本產(chǎn)品用于免疫沉淀時(shí)Flag融合表達(dá)蛋白的洗脫。3X Flag Peptide (3X Flag多肽)由23個(gè)氨基酸組成，含有3組Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp重復(fù)多肽。在C端的8個(gè)氨基酸組成經(jīng)典的Flag標(biāo)簽(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys; DYKDDDDK)。

3X Flag Peptide (3X Flag多肽)的主要參數(shù)

使用說明：

1、粉末裝由于微量的多肽在凍干過程中沉積在管內(nèi)，形成很薄或不可見的多肽層，所以在打開管蓋前，建議在離心機(jī)中約8,000-12,000×g離心10-30秒，使附著在管蓋或管壁上的多肽聚集于管底。

2、溶解時(shí)使用TBS進(jìn)行溶液，用移液槍的槍頭輕吹幾下或者輕輕搖晃瓶子，即可使多肽wan全溶解。請(qǐng)勿用vortex劇烈振蕩，以免多肽變性而失活；溶液裝可直接用于后續(xù)配制。

3、免疫沉淀樣品的3X Flag競(jìng)爭(zhēng)洗脫法：本方法為非變性法，洗脫效率高且洗脫后的樣品中不含F(xiàn)lag抗體的輕鏈和重鏈。

3.1 3X Flag多肽洗脫液的配制：根據(jù)樣品量確定洗脫液的用量，取一定量3X Flag多肽儲(chǔ)存液用TBS溶液進(jìn)一步稀釋3X Flag多肽溶液至150μg/ml。

3.2 每個(gè)免疫沉淀樣品加入100μl 3X Flag多肽洗脫液(150μg/ml)，冰浴并搖晃孵育30分鐘-2小時(shí)，為了提高洗脫效率，可延長(zhǎng)孵育時(shí)間或重復(fù)洗脫。3X Flag多肽洗脫液體積一般為凝膠懸液的5倍。

3.3 4oC，6000×g離心30秒，小心轉(zhuǎn)移上清至新管中，上清即為洗脫的Flag融合蛋白。注意不要吸到凝膠。

3.4 洗脫的Flag融合蛋白置于4oC待用，或者-20oC長(zhǎng)期保存。